Mission : L'ingénieur/ingénieure d'étude travaillera sur un projet financé par Sidaction à l'Institut de Recherche en Infectiologie de Montpellier (IRIM) dans l'équipe de Laurence Briant et Jean-Luc Battini sous la direction de Lise Chauveau. Le projet consiste à étudier l'incorporation de métabolites cellulaires dans les particules du VIH et leurs effets sur l'infection et la réponse immunitaire dans les cellules cibles du virus. Dans ce cadre, l'IE produira des particules virales de VIH infectieux de niveau 3 dans des lymphocytes T CD4 primaires et les purifiera pour analyser leur contenu métabolique par spectrométrie de masse. La spectrométrie de masse sera faite par une plateforme du regroupement MetaboHub. L'IE fera ensuite la caractérisation des effets de ces métabolites incorporés sur l'infection et la réponse immunitaire dans des cellules immunitaires primaires (macrophages et cellules dendritiques dérivés de monocytes). Activités : - Culture cellulaire - Préparation et culture de lymphocytes T CD4 primaires, macrophages dérivés de monocyte et cellules dendritiques dérivées de monocyte à partir de sang de donneurs sains (EFS) - Infection des lymphocytes T CD4 avec le VIH en zone de confinement BSL3 - Cytométrie en flux - Concentration des particules virales par ultracentrifugation - Mise au point d'une méthode d'immunoprécipitation pour la purification des particules virales - Préparation et envoi des échantillons pour l'analyse par spectrométrie de masse - Clonage moléculaire de gènes d'intérêt - Génération de cellules surexprimant les gènes d'intérêt - Extinction de gènes d'intérêt par CRISPR-Cas9 - Productions virales par transfection de cellules modifiées - Vérification de l'efficacité des techniques de modification des cellules par Western Blot et quantification de métabolites d'intérêts par ELISA ou kits colorimétriques - Caractérisation des effets sur les cellules immunitaires cibles par cytométrie en flux, qPCR et ELISA multiplex - Consigner les résultats obtenus dans un cahier de laboratoire, les analyser et les présenter sous forme de présentations scientifiques - Assurer une veille scientifique et technologique dans son domaine d'activité (biblio)