Mission : Les diatomées comptent parmi les microalgues eucaryotes photosynthétiques les plus performantes. Elles colonisent toutes les zones aquatiques et sont responsables d'environ 20 % de la fixation du carbone et de la production d'oxygène sur terre. Elles sont issues d'une endosymbiose secondaire entre un protiste hétérotrophe et, au moins, un autre eucaryote photosynthétique de la lignée rouge, lui-même issu d'une endosymbiose primaire entre un protiste hétérotrophe et une cyanobactérie. Cependant, malgré leur importance écologique en tant que producteurs primaires et un intérêt croissant pour leur potentiel biotechnologique, notre compréhension actuelle de la régulation de la photosynthèse des diatomées est toujours limitée à ce jour et même les questions les plus fondamentales sur la biogenèse des plastes restent sans réponse. De plus, les approches génétiques pour étudier les fonctions des chloroplastes chez les diatomées sont pour l'instant limitées car les diatomées modèles les plus étudiées sont des phototrophes obligatoires, pour lesquels la photosynthèse est essentielle à la survie. Pour combler cette importante lacune, notre laboratoire a choisi la diatomée centrique Cyclotella cryptica comme nouveau système modèle pour l'étude de la biologie des plastes des diatomées, car c'est la seule diatomée qui combine la disponibilité de ressources génomiques et génétiques avec la capacité de croître de façon hétérotrophe à l'obscurité, en utilisant le glucose comme source de carbone réduit, ce qui autorise l'isolement de mutants photosynthétiques. La mutagenèse de gènes nucléaires utilisant la stratégie Crispr/cas9, mise en œuvre avec succès au laboratoire chez cette algue a permis d'obtenir les tous premiers mutants de photosynthèse de diatomées, ouvrant la voie à une caractérisation approfondie de la régulation de la photosynthèse et de la biogenèse des plastes. En s'appuyant sur ces récentes avancées, l'objectif de ce projet est de créer la première banque de mutants de tous les gènes du plaste (environ 1500) chez C. cryptica pour CRISPR-Cas9, et de mettre au point différentes techniques de phénotypage afin d'isoler et de caractériser les gènes mutants. Activités : Construire une banque de mutants pour CRISPR CAS9 dans la diatomée marine Cyclotella cryptica: - Biologie moléculaire (clonage, mutagénèse de plasmides, préparation et analyse d'acides nucléiques, PCR) - Génétique moléculaire des diatomées (mutagénèse, transformation, étude de l'expression génétique) - analyse de séquences d'ADN