Mission : Sous la responsabilité du Dr. Francois Foulquier et du Dr. Maxence Noel, vous serez pleinement intégré·e au développement du projet financé par la Fondation pour la Recherche sur le Cerveau (FRC). Votre mission principale consistera à assurer la génération de neurones issus d'iPSCs et de produire des vecteurs plasmidiques afin de réaliser des approches de knock-out par CRISPR/Cas9 nécessaires à la bonne réalisation de ce projet. Activités : 1. Biologie Moléculaire & Génération de Plasmides (Env. 30% du temps) • Conception et réalisation de clonages moléculaires • Transformation de bactéries compétentes et amplification de l'ADN plasmidique (MaxiPrep et glycerol stock). • Contrôle qualité des constructions (digestions de restriction, PCR, analyse et validation des résultats de séquençage Sanger). • Gestion et mise à jour de la plasmidothèque de l'équipe. 2. Culture Cellulaire (Env. 40% du temps) • Entretien, génération et congélation de cellules iPSCs, de précurseurs neuronaux et de neurones matures générés par dual-SMAD inhibition. • Fixation et marquage de cellules pour analyses par microscopie. • Réalisation de transfections transitoires de cellules HEKs et sélection de clones transfectées par puromycine pour réalisation de CRISPR/Cas9 knock-out. • Préparation des milieux de culture et des réactifs associés dans le respect des règles de stérilité (PSM). 3. Analyse biochimique et moléculaire (Env. 20% du temps) • Analyse d'expression de gènes par qPCR. • Analyse d'expression protéique par Western-blot 4. Vie du laboratoire & Traçabilité (Env. 10% du temps) • Tenue rigoureuse du cahier de laboratoire (physique ou électronique). • Participation à la gestion des stocks de consommables et réactifs liés à votre activité. • Application et respect strict des consignes d'hygiène et de sécurité (H&S) en environnement de type L1 et L2.