Description : La mission sera réalisée dans le cadre du projet « Ground stroke ». Ce projet est porté par le laboratoire de Physiopathologie et imagerie des troubles neurologiques (PhIND, UMRs 1237 INSERM, boulevard Henri Becquerel, 14000 CAEN ; http://www.phind.fr/index.php/en/). L’équipe de recherche a publié dans une étude clinique rétrospective que les taux sanguins de tPA (activateur tissulaire du plasminogène) permettaient de discriminer un AVC hémorragique d’un AVC ischémique ou mimique (Jauquet et al, Ann Clin Transl Neurol 2024). Malheureusement la généralisation de biomarqueur se heurte à la réalité clinique : l’étude a été réalisée avec une technique ELISA qui nécessite un temps expérimental non compatible avec l’urgence clinique. Le projet consiste ainsi à mettre en place un test rapide (inférieur à 2h) permettant de mesurer les taux de tPA dans un échantillon. Pour ceci, une collaboration active avec une société développant une technologie de RT-LAMP PCR a été initiée. Le but étant de détourner ce test PCR afin de doser une protéine sanguine afin de mesurer rapidement les taux de tPA circulants chez des patients arrivant aux urgences pour suspicion d’AVC._ _Des validations in vitro sur modèles cellulaires issus de cellules souches pluripotentes induites seront également effectuées afin de valider la méthodologie développée. Les cellules sont déjà en place au laboratoire mais le candidat participera activement à la mise en place d’un modèle de BHE utilisant des cellules endothéliales cérébrales humaines dérivées d’iPSC en microfluidique. POSITIONNEMENT HIÉRARCHIQUE La personne recrutée sera basée au sein de l’unité U1237 dirigée par Denis Vivien, au sein de l’équipe TRANSCEND dirigée par Benoit Roussel et Richard Macrez. La personne travaillera directement avec Benoit Roussel, qui dirige ce projet. Profil recherché : REVUES DE LITTÉRATURE : Identifier les procédures existantes pouvant aider à la réalisation du projet. MISE AU POINT D’UN PROTOCOLE : Concevoir des protocoles adaptés au dosage du tPA (ELISA et ses dérivés de RT-LAMP PCR*). Concevoir des protocoles de différenciations d’iPSCs et de culture cellulaire. Collaborer avec l'équipe pour définir les variables expérimentales clés.   NIVEAU REQUIS : Bac+3 minimum LES COMPÉTENCES NÉCESSAIRES SAVOIR Connaissance en biologie moléculaire et cellulaire. Savoir élaborer une procédure dans le but de mettre au point de nouvelles techniques innovantes.   SAVOIR-FAIRE Biologie moléculaire Culture d’IPSCs Culture cellulaire Test ELISA HPLC Click chemistry PCR / qPCR / Design d’amorces Western Blot Maitrise des outils de présentation écrite et orale.   SAVOIR-ÊTRE La personne recrutée travaillera en étroite collaboration avec le directeur et l’unité INSERM UMR-S 1237 PhIND. Autonomie – prise d’initiatives Organisation Esprit d’équipe, ouverture d’esprit et curiosité – appétence pour des projets pluridisciplinaires ENVIRONNEMENT DE TRAVAIL L’unité est hébergée sur le site du centre CYCERON au sein de l’institut BBM@C, associée à de nombreuses plateformes (ESR3P, InnovaSeq, plateformes d’imagerie …) et au CHU de Caen, permettant un accès aux échantillons humains.