Mission : Développer, standardiser et valider des modèles de co-culture 2D et 3D de neurones corticaux et d'astrocytes dérivés de mESC, et les exploiter pour caractériser le rôle de gènes de TND dans ces deux populations cellulaires. Activités : Activité 1 : Différenciation neurale de cellules ES murines - Culture, amplification et contrôle qualité des lignées de mESC issues des modèles murins du syndrome de Down - Mise au point et standardisation des protocoles de différenciation en neurones corticaux et en astrocytes - Caractérisation des cultures : marqueurs moléculaires, pureté, reproductibilité inter-expériences Activité 2 : Mise en culture d'astrocytes et de neurones primaires - Prélèvement des cerveaux issus de modèles murins du syndrome de Down - Établissement des conditions de culture des neurones et des astrocytes - Définition des paramètres critiques et des critères de validation des modèles - Rédaction des modes opératoires et transfert des protocoles au service Activité 3 : Développement de modèles de co-culture 2D et 3D - Établissement des co-cultures neurones/astrocytes en 2D et en 3D (tâche 2.1.3) - Définition des paramètres critiques et des critères de validation des modèles - Rédaction des modes opératoires et transfert des protocoles au service Activité 4 : Étude du rôle de Dyrk1a et de Cbs dans les neurones et les astrocytes - Études d'expression des marqueurs moléculaires par imagerie, transcriptomique en cellule unique, protéomique et métabolomique Activité 5 : Traitement, analyse et valorisation des données - Analyse, interprétation et validation statistique des résultats - Rédaction des rapports et des publications ; présentation en réunions de consortium et en congrès - Participation à la rédaction de dossiers dans le cadre des demandes de financement Activité 6 : Veille, formation et contribution au fonctionnement du service - Veille scientifique et technologique sur les modèles cellulaires des troubles du neurodéveloppement - Formation et conseil des utilisateurs internes et externes aux techniques mises en œuvre - Application des règles d'hygiène et de sécurité (NSB2, OGM) et gestion des moyens alloués au projet - Transfert des protocoles standardisés pour nouvelles offres dans le service