Mission : La mission principale de l'ingénieur(e) d'étude consistera à développer des modèles génétiques in ovo et en cellules souches embryonnaires murines (mESC) afin d'étudier les effets de facteurs de transcription de fusion impliquant PAX3 dans les progéniteurs musculaires et neuraux. La personne recrutée réalisera également les premières expériences d'analyse des phénotypes après modulation de l'expression de ces facteurs de fusion in ovo et dans des organoïdes dérivés de cellules souches pluripotentes. Activités : Activité 1 : Construction de plasmides d'expression • Conception et génération de plasmides d'expression des facteurs de fusion impliquant PAX3. • Construction de plasmides permettant la recombinaison homologue. Activité 2 : Création et gestion de lignées cellulaires transgéniques • Participation à la génération de lignées de cellules souches embryonnaires murines (mESC) transgéniques. • Mise en place, gestion et suivi du cell banking (congélation, décongélation, maintenance des lignées). Activité 3 : Différenciation cellulaire et production d'organoïdes • Développement, adaptation et optimisation de protocoles de différenciation des mESC en organoïdes spinaux. • Suivi morphologique et phénotypique des cultures. Activité 4 : Électroporation du tube neural d'embryons de poulet • Réalisation d'électroporations in ovo du tube neural d'embryons de poulet. Activité 5 : Caractérisation moléculaire et phénotypique • Analyses de génotypage (PCR, séquençage Sanger et/ou NGS). • Analyses histologiques • Immunohistochimie et imagerie confocale. • Contribution à l'analyse et à l'interprétation des données expérimentales. Activité 6 : Support scientifique et technique • Accompagnement et contribution au travail collaboratif dans le cadre du projet. • Rédaction, mise à jour et transmission des protocoles expérimentaux. • Participation au maintien d'un environnement de laboratoire conforme aux règles de sécurité, de qualité et de traçabilité.